一、实验目的 2、熟悉定性、定量测定的方法 二、实验原理 紫外分光光度法(Ultraviolet Spectrophtometry)，又称紫外吸收光谱法( Ultraviolet Moleculor Absorption Spectrophtometry)，它是研究分子吸收190.0~1100.0nm波长范围内的吸收光谱。紫外吸收光谱主要产生于分子价电子在电子能级间的跃迁，是研究物质电子光谱的分析方法。通过测定分子对紫外光的吸收，可以对大量的无机物和有机物进行定性和定量测定。 苯酚是一种剧毒物质，可以致癌，已经被列入有机污染物的黑名单。但在一些药品、食品添加剂、消毒液等产品中均含有一定量的苯酚。如果其含量超标，就会产生很大的毒害作用。苯酚在紫外光区的最大吸收波长λmax=270nm。对苯酚溶液进行扫描时，在270nm处有较强的吸收峰。 定性分析时，可在相同的条件下，对标准样品和未知样品进行波长扫描，通过比较未知样品和标准样品的光谱图对未知样进行鉴定。在没有标准样品的情况下，可根据标准谱图或有关的电子光谱数据表进行比较。 定量分析是在270nm处测定不同浓度苯酚的标准样品的吸光值，并绘制标准曲线。再在相同的条件下测定未知样品的吸光度值，根据标准曲线可得出未知样中苯酚的含量。 三、仪器与试剂 2．容量瓶(1000ml、250ml) 3．比色管(50ml) 4．吸量管(5ml、10ml) 5．苯酚(AR) 准确称取苯酚0.010g于200ml蒸馏水中，溶解后定量转移到1000ml的容量瓶中，作为储备液。 于5支50ml的比色管中，用吸量管分别加入0.5 ml、2ml、5ml、10ml、20ml的10ug/ml苯酚标准溶液，用蒸馏水定容至刻度，摇匀。 四、最大吸收波长的选择 在标准系列溶液中任取一种，以水为参比，分别在波长200~300nm之间以10为间隔测定其吸收波长，在吸光度最大值附近以间隔2为单位测定，直至找到最大吸收波长。 五、标准曲线绘制 在已筛选的最大波长下，以水为参比分别测定上述标准溶液的吸光度，画出C-A曲线，写出回归曲线方程。 六、苯酚浓度的测定 在相同情况下，测定其吸光度。根据回归曲线方程计算出待测苯酚浓度。 七、问题讨论 1、紫外可见分光光度法的定性、定量分析的依据是什么？ 3、说明紫外可见分光光度法的特点及适用范围。 |
